一文與您分享LAMP鑒定試劑盒的使用方法
點(diǎn)擊次數:527 更新時(shí)間:2023-04-24
LAMP鑒定試劑盒是一種基于Loop-mediated Isothermal Amplification(LAMP)技術(shù)的分子診斷試劑盒,用于檢測病原體的核酸序列。以下是其使用方法:
1、樣品處理:根據所檢測的病原體不同,樣品處理方式也不同。比如對于血清樣品,需要離心去除細胞和蛋白質(zhì);對于組織樣品,需要通過(guò)機械或化學(xué)方法裂解組織細胞,釋放出核酸。處理后將樣品轉移到無(wú)菌離心管中。
2、提取核酸:使用核酸提取試劑盒進(jìn)行核酸提取。具體操作可參考試劑盒說(shuō)明書(shū),通常包括加入試劑、離心、洗滌、洗脫等步驟。注意,提取過(guò)程一定要注意無(wú)菌操作。
3、準備反應體系:根據說(shuō)明書(shū)配制反應物質(zhì),通常包括LAMP試劑、DNA聚合酶、降溫結構域(Bst酶)和特異性引物等。將反應物混合均勻,并添加到空白管中作為陰性對照。
4、添加樣品:從得到的樣品中取適量加入反應管中。注意,不同樣品需要不同的取樣量,通常為10-20μl。
5、混勻:輕輕振動(dòng)或翻轉試管,確保反應物和樣品充分混合。
6、放入放大儀:將反應管放入放大儀中進(jìn)行LAMP擴增反應。LAMP反應需要在等溫條件下進(jìn)行,通常為60-65℃。反應時(shí)間根據不同試劑盒和樣品可能會(huì )有所不同,一般為30-60分鐘。
7、判斷結果:利用放大儀或其他設備觀(guān)察反應管內是否出現熒光信號。若出現熒光信號,則表示所檢測的樣品中存在目標病原體核酸序列;否則,表示不存在。同時(shí),還可以通過(guò)提供的質(zhì)控線(xiàn)判斷試劑盒反應是否成功。
總之,LAMP鑒定試劑盒使用方法簡(jiǎn)單快捷,適用于臨床、農業(yè)、環(huán)境監測等領(lǐng)域的病原體檢測。